انت هنا الان : شبكة جامعة بابل > موقع الكلية > نظام التعليم الالكتروني > مشاهدة المحاضرة
الكلية كلية العلوم للبنات
القسم قسم علوم الحياة
المرحلة 4
أستاذ المادة امال راقب شمران عبد الخفاجي
26/12/2016 08:03:35
تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي Real-Time polymerase chain reaction)
ويسمى أيضا تفاعل البوليميراز المتسلسل ألكمي quantitative real time polymerase chain reaction) (بسبب قياسه كمية الحمض النووي أو أيضا تفاعل البوليمراز المتسلسل الحركي وهو أداة مهمة في علم ألأحياء الجزيئي. تعتمد هذه التقنية المخبرية على نفس مبدأ تفاعل البوليميراز المتسلسل ولكن ألفرق هو أنه يتم تقدير كمية الدنا المتضاعف خلال حدوث التفاعل ومباشرة. وكثيرا ما يعتمد تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي على الاستنساخ العكسي لعملية تحديد كمية مرسال الحمض الخماسي النووي mRNA في الخلية وكذلك الرنا غير المشفر أيضا. يتيح تفاعل البلمرة المتسلسل اللحظي رصد و قياس كميات المتتابع النووي في عينة تحمل حمض نووي خماسي سواء مؤكسد أو غير مؤكسد DNA/RNA. كمية الحمض النووي التي يتم قياسها حيث تكون رقما مطلقا لعدد النسخ للمتتابع .
طريقة عمل التفاعل اللحظي تشبه تفاعل البلمرة التقليدي حيث تكون الخطوة الأساسية هي اكثار الحمض النووي و يتم رصد عملية الإكثار خلال تقدم التفاعل بطريقة لحظية. وهذه الخاصية تتيح رصد التفاعل حتى نقطة النهاية. توجد طريقتان لرصد المنتج في تفاعل البلمرة اللحظي: (1) الصبغات المشعة غير المتخصصة و التي ترتبط بأي متتابع نووي ( سكر خماسي مؤكسد) و (2)probes المتخصص و المحتوي على وحدات نيوكليوتيدية معلمة بجزيئات مشعة تتيح الرصد بعد عملية الاقتران بين probes و الحمض النووي المكملة لها.
Real time quantitative PCR uses fluorophores in order to detect levels of gene expression.
A-normal probe
B- probe binding with specific gene
C-probe cleavage by polymerase
المادة المعروضة اعلاه هي مدخل الى المحاضرة المرفوعة بواسطة استاذ(ة) المادة . وقد تبدو لك غير متكاملة . حيث يضع استاذ المادة في بعض الاحيان فقط الجزء الاول من المحاضرة من اجل الاطلاع على ما ستقوم بتحميله لاحقا . في نظام التعليم الالكتروني نوفر هذه الخدمة لكي نبقيك على اطلاع حول محتوى الملف الذي ستقوم بتحميله .
|